一、简述抗氧化肽的作用（论文文献综述）
刘晓艺[1]（2021）在《红花籽蛋白制备抗氧化肽的研究及应用》文中研究说明我国红花产量处世界前列,红花加工企业层出不穷,但主要集中于红花籽油的开发,其加工副产物红花籽粕中25%～40%的优质植物蛋白质资源没有得到合理高效的利用。食源性多肽具有安全性高、生产成本低、易吸收和多种功能活性等优点,故红花籽多肽具有广阔的市场前景。本研究以红花籽粕为原料提取红花籽蛋白,以抗氧化活性和水解度为评价指标,复合酶解法制备红花籽抗氧化肽,研究不同分子量多肽抗氧化活性的稳定性,得到活性较高且稳定性强的多肽组分,并利用小鼠模型研究多肽体内抗氧化活性,最后以红花籽抗氧化肽为主要原料开发一款功效性多肽饮料。主要研究结果如下:（1）以水解度（degree of hydrolysis,DH）和多种自由基清除率为指标,筛选复合蛋白酶。通过单因素试验和响应面优化复合酶解工艺,获得最佳酶解条件为底物浓度5%,p H 8.0,碱性蛋白酶∶中性蛋白酶2∶1,酶解温度50℃,酶添加量7000 U/g,酶解2 h,酶解产物DPPH自由基清除率为75.66%。（2）对红花籽蛋白酶解产物超滤分离后抗氧化性较强组分（<3 k Da、3～5k Da）的稳定性进行研究,两组都能在高温、弱酸弱碱环境下保持自由基清除率;添加Na Cl、柠檬酸及葡萄糖对自由基清除率有增效协同作用,蔗糖和防腐剂影响不明显;Zn2+、Cu2+及K+等金属离子导致两组分抗氧化活性显着下降;模拟胃肠消化后,<3 k Da抗氧化肽组分稳定性更强,胃消化对抗氧化活性的影响小于肠消化。（3）红花籽抗氧化肽（<3 k Da）灌胃氧化损伤小鼠试验显示,整个周期小鼠体重稳定增长,模型组与正常组各指标均差异显着,红花籽抗氧化肽组相比模型组能显着提高小鼠脏器指数。各受试组与模型组相比能显着提高小鼠血清、肝脏及心脏中总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、抗氧化酶活性,降低丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,且红花籽抗氧化肽高剂量组与Vc组无显着差异,能够减轻氧化应激并促进小鼠生长代谢。（4）红花籽抗氧化肽饮料产品的最佳配比各添加量为食用盐0.1%,山梨酸钾0.1%、羧甲基纤维素钠（carboxymethyl cellulose-Na,CMC-Na）0.2%,甜味剂（蔗糖∶葡萄糖=1∶3）8%,柠檬酸0.4%,红花籽抗氧化肽10%,抗氧化肽饮料感官评分为95.17。
冯玲玲[2]（2021）在《海蜇胶原抗氧化肽的制备分离、结构解析及活性研究》文中研究说明海蜇是一类食源性生物,含有丰富的胶原蛋白,其可经水解形成能直接被人体肠道所吸收的肽,具有较强的抗氧化作用。本文首先对海蜇胶原蛋白进行提取及结构特性研究,其次对胶原抗氧化肽进行制备、结构特性、分离鉴定以及抗氧化活性研究,旨在为寻找天然抗氧化剂提供实验数据支撑。具体研究内容及实验结果如下:（1）利用盐酸-胃蛋白酶法可成功从海蜇中提取到高纯度Ⅰ型胶原蛋白,其亚基结构为[α1（Ⅰ）]3。海蜇胶原蛋白中含有15.94%的亚氨基酸,且甘氨酸含量最高（25.99%）,不含半胱氨酸和色氨酸。热收缩温度为43.79℃,热稳定性较好。海蜇胶原蛋白分子排布紧凑,具有较完整的三螺旋结构,且微观呈多层聚集、以纤维为主的无规则网状结构。（2）海蜇胶原抗氧化肽酶解工艺优化试验结果表明,胰蛋白酶为最适用酶,酶解条件为温度41.0℃、时间5.9 h、pH 7.9、酶添加量8.5 u/mg。该条件下,海蜇胶原抗氧化肽的活性与其质量浓度呈正相关,Fe3+还原力最大吸光度为0.4125,DPPHs·、·OH、ABTS+·自由基的IC50值分别为32.28、3.12、0.74 mg/mL。结构特性研究结果表明,海蜇胶原抗氧化肽主要为1000 Da以下的肽段,其芳香族氨基酸、疏水性氨基酸以及必需氨基酸含量均明显高于酶解前的胶原蛋白。酶解作用使胶原蛋白原有的三股螺旋结构遭到破坏,分子结晶度下降,有序程度减弱,微观呈不规则的碎片状结构。（3）利用超滤、Sephadex G-15 凝胶色谱、Nano-LC-ESI-Q-Orbitrap-MS/MS 和Denovo技术从海蜇胶原抗氧化肽中分离鉴定并筛选得到10条氨基酸序列符合抗氧化肽特征的肽段,分别为 YLGPK、YGLPNLK、YAPFD、AYPNM、FPLP、PNLGAPGS、VGDLGPR、VPLP、LVVHYP、LVGDLGPR。（4）对10条肽段进行抗氧化活性测定与比较。化学抗氧化实验表明,YAPFD具有最大的DPPH·和·OH自由基清除率,LVVHYP具有最大的ABTS+.自由基清除率和Fe3+还原力,不同氨基酸序列的肽段间既存在着协同作用也存在拮抗作用。HepG2细胞抗氧化实验表明,AYPNM对ABAP诱导的脂质自由基具有最强的清除力,LVGDLGPR则对H2O2诱导的ROS具有最强的清除力。
王珍如[3]（2021）在《羊血来源生物活性肽抗氧化活性的研究》文中进行了进一步梳理本论文旨在研究羊血来源生物活性肽的抗氧化活性,采用酶解法处理羊血红蛋白,综合其水解特性及其抗氧化活性筛选出最适蛋白酶,通过单因素试验及响应面试验研究确定其最佳制备工艺,从清除自由基及还原力角度探究其体外抗氧化能力,建立大鼠Diquat氧化应激模型进行体内抗氧化试验。试验结果表明:1.用E蛋白酶、M蛋白酶、F蛋白酶和N蛋白酶水解羊血红蛋白,以DPPH清除率、羟自由基清除率为评价指标,综合筛选出M蛋白酶为最佳水解用酶。通过单因素和响应面试验设计,获得制备羊血来源抗氧化肽的最优工艺条件:水解温度49℃、底物浓度7%、水解时间3h、水解PH7.0和酶添加量5%,在该条件下,所得抗氧化肽的DPPH清除率高达98.15%。2.采用优化后的条件制备羊血来源抗氧化肽,冻干成粉用蒸馏水分别配制不同浓度的溶液,通过测定其还原力、OH自由基清除率、DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除力计算IC50值以评价其体外抗氧化活性,结果表明羊血来源抗氧化肽对DPPH自由基的IC50清除率为2.59 mg/ml,对羟自由基的IC50清除率为6.42 mg/ml,对ABTS自由基的IC50清除率为0.84 mg/ml。3.选取18只Wistar大鼠,采用Diquate建立氧化应激模型,确定800mg/kg BW为缓解氧化应激剂量,饲喂羊血来源抗氧化肽,其中各组大鼠的采食量、体重和脏器重无显着性差异（P>0.05）;饲养14d时血中MDA指标降低且各组差异显着（P<0.05）,SOD及T-AOC指标升高但各组差异不显着（P>0.05）;攻毒后,羊血来源抗氧化肽可缓解大鼠的氧化应激状态,各脏器抗氧化指标呈现出不同的抗氧化规律且对大鼠肝脏、肾脏和回肠Nrf2-ARE信号通路及NF-KB相关m RNA产生一定的影响。
蔡转章[4]（2021）在《豆粕源抗氧化肽对急性酒精性肝损伤的预防作用及机制研究》文中认为本研究隶属于吉林省教育厅科学技术研究项目（JJKH20211129KJ）。近年来,随着酒精消费水平的持续增加,我国的酒精性肝病发病率亦呈逐年上升趋势,已严重危害到国人的生命与健康。利用食源性抗氧化活性物质干预调节由酒精摄入引起的机体氧化应激状态,是缓解和改善酒精性肝损伤的重要途径。豆粕中富含大豆优质蛋白,经水解获得的豆粕源抗氧化肽（Soybean meal-derived antioxidant peptides,SAPs）具有预防酒精性肝损伤的潜力,但目前并未见相关研究报道。本文以SAPs为研究对象,首先通过单因素和响应面实验优化了超声辅助酶解制备工艺参数,然后利用超滤技术进行分离纯化,同时筛选出抗氧化活性最优的组分进行序列鉴定,并对鉴定所得肽进行抗氧化活性表征。最后通过构建小鼠模型,从氧化应激、脂质代谢及炎症因子的角度探究了SAPs对急性酒精性肝损伤的预防作用效果,并借助转录组学技术阐明其预防作用机制。本研究能够提高大豆产业附加值,并对开发安全有效的食源性保肝护肝功能肽产品具有重要意义。全文的主要研究内容及结果如下:（1）以豆粕为原料,进行了SAPs的制备、分离纯化、序列鉴定及抗氧化活性表征的研究。结果表明:采用超声辅助酶解法制备SAPs的最佳工艺条件为酶解p H 8、底物浓度9%、加酶量6665.39 U/g、温度50℃、酶解时间4 h、超声时间9 min、超声功率300 W。分离纯化后得到分子量<1k Da的组分（SAPs5）抗氧化活性最优。将SAPs5组分进行序列鉴定,共得到10条肽序列,分别是YLFKD、IWNLN、GTYW、CLA、KVW、LRC、SLW、VYV、WLQ和YYK。通过固相合成上述肽,然后进行抗氧化活性表征,得到4肽序列GTYW活性最佳,这可能与肽链中存在的酪氨酸和色氨酸密切相关。（2）将实验小鼠分成空白组（CK）、模型组（M）、对照组（GSH）和SAPs组（SAPs5和GTYW）,通过预先给予ICR小鼠SAPs（SAPs5和GTYW）干预,然后构建急性酒精性肝损伤模型,从氧化应激、脂质代谢及炎症因子的角度探究其预防作用效果。结果表明:与M组相比,SAPs组的血清AST/ALT、TC和TG含量,以及肝脏CYP2E1、IL-6、IL-1β与TNF-α含量均有显着性降低（p<0.05）。虽然在SAPs组中,肝脏MDA含量有所下降,且肝脏GSH含量、T-SOD和CAT活力也有不同程度的升高,但与M组相比并无显着性差异（p>0.05）。在病理切片中,SAPs组的肝细胞及肝索结构相较于M组更加清晰与完整,而肾脏细胞及其结构基本没变化。综上所述,SAPs可通过提高机体抗氧化能力、减少脂质蓄积以及炎症因子释放量,达到保肝护肝的作用效果。（3）为明确SAPs（SAPs5和GTYW）干预调节急性酒精性肝损伤的作用机制,基于Illumina hiseq测序平台进行转录组学研究。结果表明:提取所得各实验小鼠的肝脏组织RNA纯度与质量较高（OD 260/280≥1.95,OD 260/230≥2.14,浓度≥1000 ng/μL,RIN值≥7.00）,经过RNA-seq测序,测序数据的质控以及比对结果良好（测序碱基的平均错误率<0.03%,Q20>97%,Q30>91%,Total mapped>90%）。通过差异分析,以M作为参照,GSH、SAPs5和GTYW分别上调基因696、1076和1285,下调基因677、661与1012。经过功能分析,得到SAPs干预后的差异基因主要富集在与炎症、氧化应激及脂质代谢相关的反应过程及代谢通路中。通过SAPs的干预,可显着上调基因Acsl1、Aqp8、Aox1、Gclc和Srebf1,下调Cxcl1、Il1r1和Lbp基因（p<0.05）,发挥促进脂质代谢、减少炎症因子释放、缓解氧化应激损伤的作用。
张欢[5]（2021）在《茶叶厌氧发酵中高含量没食子酸形成以及茶蛋白降解促进活性肽释放的研究》文中进行了进一步梳理没食子酸（Gallic acid,GA）具有多种生物活性,茶鲜叶中GA含量较低,仅为0.20～1.00 mg/g。我们课题组发现夏秋茶鲜叶经厌氧发酵所制得的酸茶中GA含量超过20.00 mg/g,然而,形成高含量GA的调控机理尚不清楚。酯型儿茶素,特别是EGCG,水解促进GA的生成已在较多好氧型发酵茶中被报道,但我们发现EGCG在厌氧发酵茶中可能对提高GA含量的贡献不大,这表明厌氧发酵中存在另一条促进GA积累的途径。众所周知,茶叶富含蛋白质,约占干重的20～30%,具有多种生物活性,由于其多数为非水溶性蛋白,营养价值的发挥尚需酶促水解反应成小分子蛋白、多肽或者氨基酸。微生物发酵被认为是降解茶蛋白的一种有效方式,然而,茶蛋白质组在发酵过程中的变化规律及其对多肽和氨基酸释放的影响尚不清楚。为此,本研究选用经厌氧发酵0、6、12、18、24和30天后的酸茶样本,对其进行GA和儿茶素类物质的检测,并基于酸茶代谢组的全面分析筛选转化形成GA的关键前体物;同时,利用微生物组学筛选作用GA形成的关键微生物,并尝试了解作用前体物转化形成GA的微生物源酶蛋白。另一边,借助非标定量蛋白质组学技术对厌氧发酵过程中茶蛋白的变化规律进行解析,了解发酵过程中可能被降解的重要茶蛋白以及促进茶蛋白降解的微生物;此外,对茶叶蛋白降解过程中产生的活性肽,特别是潜在的抗氧化肽,也做了进一步分析。结果可为微生物发酵提高GA含量以及发酵中茶蛋白降解形成多肽的研究提供新知识;同时,利用夏秋茶鲜叶开发富含GA的功能茶产品,为提高我国茶叶资源利用率以及茶产业经济稳定发展提供新思路。主要研究结果如下:（1）经厌氧发酵18天,GA的含量由1.72 mg/g（0 d）显着上升至24.26 mg/g;发酵中GA的提高伴随着ECG、EAG和7-GC含量的显着下降,而EGCG的含量近乎稳定存在于整个发酵过程中。这表明EGCG对GA含量的提高贡献不大,而ECG、EAG和7-GC可能是厌氧发酵中转化形成GA的关键前体物。（2）厌氧发酵中海枣曲霉（A.phoenicis ATCC 13157）和塔宾曲霉（A.tubingensis strain CBS 134.48）分泌的羧酸酯酶可能是促使ECG、EAG和7-GC转化形成GA的驱动力。（3）细菌源的GA是厌氧发酵中高含量GA形成的另一途径,其中芽孢杆菌（Bacillus）等细菌被认为是生产GA的关键微生物。（4）茶叶蛋白在厌氧发酵中存在一个缓慢降解的过程,中高丰度的亲水性茶蛋白可能是首先被降解的目标蛋白,例如tubulin和rubisco家族以及一些调控植物生理代谢相关的酶蛋白。（5）厌氧发酵中乳杆菌（Lactobacillus）、葡萄球菌（Staphylococcus）和希瓦氏菌属（Shewanella）等细菌自身活跃的生理代谢以及来自曲霉属的水解酶类可能共同促进了茶蛋白的降解。（6）厌氧发酵是一个酸度和氨基酸总量（FAAs）逐渐上升的过程,常见的18种游离氨基酸对FAAs的增加贡献不大,而大量的短肽被释放可能是引起酸茶中FAAs被增加的主要原因。（7）26个短肽被预测具有潜在的抗氧化活性,其中7个潜在的抗氧化肽（I L W、W L R、W Y、Y V、E L W、F Y和P Y V）被认为是提高酸茶抗氧化能力（DPPH和羟自由基清除力）的关键肽。茶叶中某些可溶性蛋白的降解,特别是参与植物代谢调控的酶蛋白—tubulin和rubisco家族蛋白,可能是释放这些潜在抗氧化肽的关键茶蛋白。
岳阳[6]（2021）在《大米抗氧化肽的制备及其抗衰老功能研究》文中进行了进一步梳理我国拥有丰富的大米资源,稻谷年产量占全世界30%。大米蛋白是大米的主要的营养成分,对其酶解制备生物活性肽,可实现其高值化利用。对大米蛋白酶解制备抗氧化肽的研究最为广泛,但是都集中在制备工艺优化和分离纯化的层面,对于大米抗氧化肽的抗衰老功效和潜在的分子机制却鲜有报道。因此,本研究在优化大米抗氧化肽的酶解工艺基础上,利用化学抗氧化法和果蝇模型综合评价了大米抗氧化肽的体外抗氧化能力和抗衰老作用,并进行机理初探,最后对纯化肽进行分子量测定、序列鉴定和抗氧化性分析,以期为衰老机制及抗衰老药物的研究提供参考,为大米抗氧化肽相关保健产品的开发提供科学依据。主要研究结果如下:（1）大米抗氧化肽的制备工艺优化以抗氧化能力（ABTS自由基清除率、ORAC值）和水解度为筛选指标,确定中性蛋白酶为最适酶。通过单因素实验、响应面实验与BP神经网络-遗传算法模型对比,优化得到大米抗氧化肽制备工艺条件:反应温度50℃,体系p H 8.2,料液比17.65 g/100 m L,酶添加量4374 U/g。（2）大米抗氧化肽体外抗氧化能力的测定及结构表征化学抗氧化实验结果表明,大米抗氧化肽具有较强的DPPH、ABTS和羟自由基清除能力,还具有金属离子螯合能力、金属离子还原能力和抑制脂质过氧化能力,且抗氧化能力与其浓度呈正相关。通过红外光谱仪、扫描电镜和差示扫描量热仪对蛋白酶解前后的结构进行表征,发现在蛋白酶解为肽的过程中,二级结构改变、微观结构由球状分布变为多孔碎片状分布、疏水性氨基酸含量增加,这可能是大米抗氧化肽具有较强抗氧化能力的原因。（3）大米抗氧化肽的抗衰老作用及机理初探基于果蝇模型,发现0.2%和3.2%剂量的大米抗氧化肽能够显着延长果蝇的最高寿命、半数死亡时间和平均寿命,增加果蝇体内抗氧化酶SOD、Mn-SOD、CAT活性,降低MDA含量,提高果蝇在急性氧化损伤模型中的存活率。初步探讨大米抗氧化肽的抗衰老作用机制,结果表明大米抗氧化肽是通过抗氧化途径Nrf2/Keap1、衰老相关信号通路（TOR,S6K）和长寿基因MTH来调控衰老的。（4）大米抗氧化肽的分离鉴定及构效关系研究通过Sephadex G-25葡聚糖凝胶柱对大米抗氧化肽进行分离纯化,得到抗氧化活性最高的F2组分,再通过MALDI-TOF-MS/MS法进行氨基酸序列鉴定,得到一个四肽SPEH,能够通过氢键、盐桥、π-π相互作用与FKBP12-FRB蛋白结合形成稳定的复合物,从而阻断m TOR信号通路。
赵玉滨[7]（2021）在《英国红芸豆蛋白抗氧化肽糖基化改性及产物功能性质研究》文中认为抗氧化剂（Antioxidants）是一类可以抑制生物大分子过氧化或清除体内自由基,从而祛除自由基对人体损害的一类物质。抗氧化肽是抗氧化剂的一种,是通过水解动植物蛋白获得的生物小分子活性肽,具有低毒无害且来源广泛等优点。研究团队在前期制备了具有良好抗氧化活性的英国红芸豆蛋白抗氧化肽,但活性低于目前食品工业应用的合成抗氧化剂。为了进一步提高其抗氧化活性,以抗氧化肽的冻干粉为原料与木糖进行糖基化反应,首先,确定糖基化改性最佳反应条件;其次,利用荧光光谱、紫外光谱、傅里叶中红外光谱、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等分析糖基化改性产物的性质,然后对糖基化改性产物的功能性质进行测定分析,最后进行了体外胃肠道模拟消化分析。为英国红芸豆抗氧化肽糖基化改性产物更好的运用到现代食品工业提供理论依据。研究结果如下:1.英国红芸豆抗氧化肽最佳糖基化改性条件通过单因素试验、正交试验和验证试验确定了糖基化改性的最佳反应条件。研究结果表明,在反应温度为90℃条件下,反应溶液的p H对糖基化改性产物羟基自由基清除能力影响最大,反应时间对反应产物中丙烯酰胺含量影响最大。糖基化改性最佳反应条件为:在糖基化反应温度为90℃条件下,反应体系中抗氧化肽浓度为10 mg/m L、p H 7、反应时间为4 h、糖肽比为1:1。在此条件下制备的糖基化改性产物得率为98.6%,较改性前羟基自由基清除率、DPPH自由基清除率、还原力和亚铁离子螯合能力都有显着提升,分别提升了80.9%、75.1%、135.7%、27.2%,丙烯酰胺生成量低至359.23μg/L,与我国丙烯酰胺含量行业标准接近;其中与亚铁离子螯合能力高于相同浓度下维生素C的螯合能力,可能原因是英国红芸豆抗氧化肽糖基化改性产物中含有较多的与亚铁离子螯合的基团,所以是一种较为理想的金属螯合剂,可以抑制食品体系当中物质的氧化。2.英国红芸豆抗氧化肽糖基化改性产物分析通过对糖基化产物的褐变程度、接枝度、粒径分布、Zeta电位的测定和荧光光谱、紫外光谱、傅里叶中红外光谱和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。试验结果表明:在最佳反应条件下褐变程度为0.52,接枝度DG%为39%,粒径分布减小,反应之后粒径分布在100nm-300 nm之间;Zeta电位绝对值增大,由芸豆抗氧化肽的23.3 m V增大到36.6 m V;通过荧光光谱分析发现:反应前的抗氧化肽最大吸收峰在413 nm附近,最大荧光强度为3761,改性后的反应产物最大吸收峰在417 nm,最大荧光吸收强度达到了12806,糖基化改性产物的荧光吸收强度显着高于芸豆抗氧化肽的最大荧光吸收强度,证明芸豆抗氧化肽和木糖之间的糖基化反应发生并产生了荧光物质;通过对紫外吸收光谱分析发现:反应产物的吸收峰发生了蓝移现象,在265-275 nm处紫外吸收强度增大;通过红外吸收光谱分析发现:在3373.26 cm-1和2926.53 cm-1两处均有伸缩振动吸收,N-H键变形振动,酰胺I带这一区间在1663.74 cm-1处发现变化,说明芸豆抗氧化肽在糖基化改性过程中产生C=O伸缩震动,酰胺II和酰胺III带这一区间变化分别出现在1597.64 cm-1和1412.46 cm-1处,这一区间主要来自于C-N的伸缩和N-H的变化;通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图分析发现,糖基化改性产物的条带颜色较芸豆抗氧化肽的变浅,原因是经过糖基化反应后,反应产物中自由氨基含量减少。3.糖基化改性产物功能性质的分析通过对英国红芸豆抗氧化肽和糖基化改性产物功能性质的分析发现,糖基化改性产物较芸豆抗氧化肽的各项指标均有不同程度的提升。糖基化改性产物的各项功能性质测定结果如下,除吸水性以外其他指标均有提升:溶解性提高了89.9%,起泡性和起泡稳定性分别提高了51.7%和25.4%,乳化性和乳化稳定性分提高了29.8%和42.5%,吸油性提高了52.8%,但是吸水性降低了22.5%,黏度提高了25.0%,游离巯基含量提高了65.6%,表面疏水性提高了150.9%。4.体外胃肠道模拟消化分析经过体外胃肠道模拟消化,糖基化改性产物较改性前的体外抗氧化活性均有显着（P<0.05）提高。经过体外模拟胃部消化后,糖基化改性后较改性前羟基自由基清除率、DPPH自由基清除率、还原力和亚铁离子螯合能力分别显着提高了66.0%、44.8%、118.5%和49.0%;再经过体外模拟肠道消化后分别显着提高了51.5%、36.2%、128.2%和46.0%,改性后的糖基化产物的抗氧化能力与同等浓度维生素C接近,糖基化改性产物经体外模拟消化抗氧化活性进一步提高,其经消化道后抗氧化活性不会受到影响,进而说明糖基化改性产物有很好的抗氧化稳定性。以上结果表明英国红抗氧化肽经过糖基化改性后的功能特性得到进一步提升,拓宽了糖基化改性产物的使用环境和用途,具有较高的应用潜力,为糖基化改性产物早日应用于食品工业提供了理论依据。
穆秋霞[8]（2021）在《英国红芸豆抗氧化肽对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用》文中指出近年来,与氧化损伤有关的慢性疾病已经严重影响到人类健康,当机体受到外界刺激时,体内活性氧（ROS）增加,导致氧化还原系统失衡,进而积累过多的ROS,而过多ROS会损伤细胞、组织以及系统等,进而造成一系列疾病。合理使用抗氧化剂可以抑制或减缓氧化的发生,但由于合成抗氧化剂具有较大的毒性,所以天然抗氧化剂因其毒副作用小且抗氧化能力强而受到越来越多人的关注,其中抗氧化肽是新型的天然抗氧化剂。抗氧化肽因具有较强的抗氧化活性和很高的生物安全性而成为国内外的研究热点。本文以英国红芸豆为原料,首先,利用碱性蛋白酶酶解制备英国红芸豆抗氧化肽,然后采用超滤分离方法将抗氧化肽进行分级,研究其不同肽段体外抗氧化活性,并且利用葡聚糖凝胶G-15层析对较高抗氧化活性的超滤组分再次进行分离纯化,最后将其作用于PC12细胞,用细胞模型探究英国红芸豆抗氧化肽对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用以及对抗氧化作用机制进行了探讨,以期为英国红芸豆抗氧化肽在食品保健及医药领域的应用提供理论依据,主要研究内容及结果如下:（1）首先,通过碱提酸沉的方法提取英国红芸豆蛋白质,再利用碱性蛋白酶水解蛋白质制备英国红芸豆抗氧化肽,用超滤法将其抗氧化肽分级,分级组分分别为:小于1 k D、1 k D-3 k D、3 k D-5 k D、大于5 k D。其次,分析各个超滤组分的体外抗氧化活性。研究结果表明:小于1 k D的英国红芸豆抗氧化肽抗氧化能力最强,羟自由基清除率为49.26%、DPPH自由基清除率为27.46%、还原力为0.501。最后,利用葡聚糖凝胶G-15层析分离纯化小于1 k D的英国红芸豆抗氧化肽,分离纯化出2个组分为BRKBAPC-1、BRKBAPC-2,峰面积分别为932.65、1440.33。（2）在前期材料制备、纯化以及体外抗氧化活性测定的基础上,首先,建立过氧化氢（H2O2）细胞氧化损伤模型。PC12细胞经125、250、500、1 000、2 000、4 000μmol/L的H2O2作用4 h后,细胞存活率分别降至77.81%、54.33%、13.83%、5.13%、1.94%以及1.77%,因此,在后续的试验中,选择250μmol/L的H2O2作为损伤模型浓度;其次通过细胞存活率确定了抗氧化肽低、中、高剂量作用浓度梯度为50、100、200μg/m L,并发现组分BRKBAPC-2相比BRKBAPC-1具有较强的保护作用和促生长作用。因此,选用BRKBAPC-2组分进一步研究抗氧化肽组分对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用。（3）以BRKBAPC-2组分为研究对象,探究对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。结果表明:抗氧化肽组分BRKBAPC-2能缓解H2O2对PC12细胞造成的细胞生长抑制作用,减少胞内活性氧（ROS）水平,维持细胞形态,降低胞内丙二醛（MDA）含量及胞外乳酸脱氢酶（LDH）活力,提高胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的酶活力以及胞内还原型谷胱甘肽（GSH）含量,并且抑制线粒体膜电位（MMP）的降低、改善细胞周期的阻滞情况、阻止细胞凋亡关键酶Caspase-3和Caspase-9的激活。综上所述,通过BRKBAPC-2组分预处理24 h后,可改善250μmol/L的H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的情况,可见,抗氧化肽组分BRKBAPC-2对细胞的氧化损伤具有一定的保护作用。
张靖[9]（2021）在《羊骨多肽的制备及其抗氧化能力研究》文中研究表明羊骨作为羊肉加工副产物具有很高的营养价值,但其生物活性物质还未被深入研究,因此本研究以羊骨为原料,通过优化酶解工艺制备羊骨抗氧化肽,对其抗氧化能力和稳定性进行分析,并表征其二级结构。进一步纯化多肽,对抗氧化能力最强的肽段进行氨基酸序列鉴定,通过功能注释、生物信息学预测筛选潜在的功能多肽。将筛选出的多肽进行化学合成,验证抗氧化活性,结果如下:羊骨氨基酸总含量为15.75 g/100g,其中疏水氨基酸占28.25%,必需氨基酸占20.44%,是抗氧化肽提取的理想原料。羊骨抗氧化肽响应面优化结果为:使用碱性蛋白酶,酶解p H 8.9、酶添加量6400 U/g、酶解时间3.25h、底物质量分数8.8%、酶解温度50℃,该条件下,水解度为（20.78±0.83）%,羊骨抗氧化肽的·OH清除能力、DPPH·清除能力、ABTS+自由基清除能力的IC50值分别为6.07 mg/m L、23.45 mg/m L、1.18 mg/m L,酶解物浓度为2 mg/m L时,测得还原力为0.15±0.003。羊骨抗氧化肽（SBAP）对高温不耐受,耐酸、碱性较弱;添加Na Cl可提高SBAP的还原力;还原糖使SBAP保持原有活性,或活性略有升高;而金属离子降低SBAP的抗氧化活性;SBAP活性对苯甲酸钠和山梨酸钾稳定;体外模拟消化表明,SBAP对人工胃肠液具有一定的惰性。结构表征显示,SBAP保留源蛋白的特征官能团,微观形貌呈疏松多孔的不规则大孔海绵状结构,α-螺旋结构和无规卷曲含量降低,β-折叠和β-转角含量升高。将最优工艺参数下制备的酶解液进行超滤分离,得到P-I（MW<3 k Da）、P-II（3 k Da<MW<10 k Da）和P-III（MW>10 k Da）。氨基酸测定结果表明:除谷氨酰胺/谷氨酸（Gln/Glu）,SBAP中其他氨基酸含量均高于羊骨粉,且必需氨基酸含量占总氨基酸的比值（EAA/TAA）为27.03%,疏水性氨基酸多达39.96%。P-I疏水性氨基酸所占比例最高,为43.13%,含有对疏水性组分有很强结合力的疏水性氨基酸（Pro、Phe、Met等）和非极性脂肪族氨基酸（Val）,且相同浓度条件下,P-I的·OH清除能力、DPPH·清除能力、ABTS+自由基清除能力和还原力活性最高。电镜图中直观地看出,P-I较其他肽段更加疏松,结构似絮状网络;体外模拟消化表明P-I表现出更高活性。对P-I进行LC-MS/MS质谱鉴定,Peptide Ranker评分大于0.85的肽段有17条,经GO和KEGG蛋白功能注释结果表明,酶解制备得到的多肽参与到生物系统、免疫系统、消化系统等多种生物过程中。结合文献报道以及功能预测网站对鉴定到的多肽进行筛选,确定合成VYPFPGPIPN、LGFPL和SLVYPFPGPIPN三条多肽。它们均具有抗氧化活性,但抗氧化活性存在差异,同时,合成肽间既存在正协同作用也存在负协同作用。
刘晶[10]（2021）在《龙须菜抗氧化肽的制备、分离纯化及结构鉴定》文中进行了进一步梳理龙须菜（Gracilaria lemaneiformis）广泛分布于我国广东、海南、山东、福建四省的沿海地带,是一种大型经济海藻,已位居我国大型海藻栽培产量的第二位。现代研究表明,龙须菜藻体内含有丰富的蛋白质、膳食粗纤维、维生素和无机盐等,同时热量值也较低。龙须菜氨基酸种类齐全,含有较多亮氨酸、丝氨酸、精氨酸等具有重要生理活性的氨基酸,具有较高的蛋白质营养价值,可作为一种优质生物活性肽的天然蛋白源。本研究首先采用响应面（response surface methodology,RSM）优化超声辅助碱提酸沉法提取龙须菜蛋白质的工艺条件,测定其氨基酸组成;其次对酶解龙须菜蛋白质的工艺条件依次使用单因素实验和正交实验法进行优化,制备酶解产物,并测定其抗氧化活性、氨基酸组成及红外光谱特性;再次,利用Sephadex G-25凝胶过滤色谱（gel filtration chromatography,GFC）和反相高效液相色谱（reverse-phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC）对龙须菜抗氧化肽进行分离纯化,借助液相色谱串联质谱（liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS）技术鉴定龙须菜蛋白源抗氧化活性肽的氨基酸序列和分子量;最后对筛选出的龙须菜抗氧化肽进行合成,测定合成肽的抗氧化活性和稳定性。利用活性肽理化性质在线预测平台评估多肽的理化性质,并采用分子对接初步探究多肽抗氧化作用的机制。研究具体结果如下:（1）以龙须菜为原料,采用超声波辅助碱提酸沉法对龙须菜蛋白质进行提取。通过单因素实验结果选择适宜的因素水平,随后使用响应面法优化了龙须菜蛋白质的提取工艺条件,建立了方程拟合度良好且显着的响应面模型。研究发现提取龙须菜蛋白质的最佳工艺条件是碱浓度0.2 mol·L-1、液固比24:1 m L·g-1、超声时间70min、超声功率482 W,实际提取率达到73.78%,与理论值大致相近。同时对龙须菜蛋白质的抗氧化活性进行了探究,结果表明龙须菜蛋白质具有一定的抗氧化能力,其铁离子还原能力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）、DPPH·和ABTS·清除的IC50分别为1.83 mg·m L-1、2.92 mg·m L-1、1.67 mg·m L-1。对龙须菜蛋白质进行氨基酸分析结果表明龙须菜蛋白是一种优质理想的植物蛋白源。（2）以水解度和抗氧化活性作为酶解条件的评价指标,分别选用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、植物蛋白复合酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶5种酶在各自最适条件下对蛋白质进行酶解,确定碱性蛋白酶为水解龙须菜蛋白质最优酶解种类。单因素实验与正交实验进一步优化酶解条件,获得龙须菜蛋白酶解产物（G.lemaneiformis protein hydrolysate,GLPH）。结果表明,加酶量2%、酶解时间2 h、底物浓度1g·（100m L）-1、p H8.0为最佳工艺参数。GLPH的ABTS·和DPPH·清除、FRAP的IC50分别为0.35 mg·m L-1、1.44 mg·m L-1、1.46 mg·m L-1。对GLPH进行氨基酸测定,发现GLPH中对疏水性氨基酸和芳香性氨基酸的含量均高于龙须菜蛋白,龙须菜蛋白酶解产物具有良好的生物学价值。傅里叶红外光谱扫描结果表明,与龙须菜蛋白质相比,酶解产物结构发生了一定改变,活性基团被暴露后更易与自由基结合,抗氧化能力更好。（3）使用Sephadex G-25凝胶色谱柱和反向高效液相色谱（RP-HPLC）对龙须菜蛋白源抗氧化肽进行分离富集,得到最主要抗氧化活性组分C2。对组分C2进行LC-MS/MS鉴定,结合PEAKS Studio version X+软件和质谱数据,并对比Uniprot数据库中的龙须菜蛋白源,BIOPEP-UWM数据库以及平均局部置信度（ALC,%）,鉴定出来源于龙须菜藻胆蛋白的三条抗氧化肽,其氨基酸序列分别为Leu-Ser-Pro-Gly-Glu-Leu（LSPGEL）、Val-Tyr-Phe-Asp-Arg（VYFDR）和Pro-Gly-Pro-Thr-Tyr（PGPTY）。测定LSPGEL、VYFDR和PGPTY三条肽的ABTS·清除率IC50后发现,PGPTY的抗氧化活性最佳(IC50=0.4495 m M)。分别考察LSPGEL、VYFDR和PGPTY的p H和热稳定性,结果表明这三条肽均具有较好的热稳定性,但是酸碱变化对抗氧化活性的影响产生了较大的差异。最后将LSPGEL、VYFDR和PGPTY分别与Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（kelch-like ECH-associated protein1,Keap1）进行分子对接,三条肽的对接能量分别为-3.88 kcal·mol-1（LSPGEL）,-3.49 kcal·mol-1（VYFDR）,-4.49 kcal·mol-1（PGPTY）,抑制常数分别为1.43 m M（LSPGEL）、2.79 m M（VYFDR）、0.51 m M（PGPTY）,多肽PGPTY的对接能量值和抑制常数均小于另外两条肽,表明其具有更好的抗氧化活性,其结果与ABTS·清除活性结果相一致。
二、简述抗氧化肽的作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、简述抗氧化肽的作用（论文提纲范文）
（1）红花籽蛋白制备抗氧化肽的研究及应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 红花概述 |
| 1.1.1 红花籽概述 |
| 1.1.2 红花籽的营养价值 |
| 1.1.3 红花籽蛋白及多肽的研究进展 |
| 1.2 抗氧化肽 |
| 1.2.1 抗氧化肽的研究进展 |
| 1.2.2 抗氧化肽的来源 |
| 1.2.3 抗氧化肽的制备 |
| 1.2.4 抗氧化肽的活性评价 |
| 1.2.5 抗氧化肽稳定性 |
| 1.2.6 抗氧化肽在食品体系中的应用现状 |
| 1.3 研究目的及意义 |
| 1.4 主要研究内容 |
| 1.5 技术路线 |
| 第2章 复合酶法制备红花籽抗氧化肽工艺研究 |
| 2.1 材料与设备 |
| 2.1.1 主要材料 |
| 2.1.2 仪器设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 基本成分的测定 |
| 2.2.2 红花籽蛋白的提取 |
| 2.2.3 蛋白酶的筛选 |
| 2.2.4 红花籽蛋白多肽的酶解工艺 |
| 2.2.5 复合酶水解红花籽蛋白单因素试验 |
| 2.2.6 复合酶水解红花籽蛋白响应面法优化 |
| 2.2.7 测定方法 |
| 2.2.8 数据统计与分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 基本成分分析结果 |
| 2.3.2 蛋白酶的筛选 |
| 2.3.3 复合酶水解红花籽蛋白单因素试验 |
| 2.3.4 复合酶水解红花籽蛋白响应面法优化 |
| 2.3.5 响应面最优条件验证 |
| 2.3.6 红花籽蛋白酶解抗氧化肽抗氧化活性评价 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 不同分子量红花籽抗氧化肽的稳定性评价 |
| 3.1 材料与设备 |
| 3.1.1 主要材料 |
| 3.1.2 仪器设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 膜超滤法分离红花籽蛋白酶解产物 |
| 3.2.2 超滤分离不同组分抗氧化活性测定 |
| 3.2.3 红花籽抗氧化肽稳定性研究 |
| 3.2.4 数据统计与分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 红花籽蛋白酶解产物不同分子量多肽抗氧化活性测定 |
| 3.3.2 红花籽抗氧化肽稳定性研究 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 红花籽抗氧化肽体内抗氧化活性研究 |
| 4.1 材料与设备 |
| 4.1.1 主要材料 |
| 4.1.2 仪器设备 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 动物分组及饲养管理 |
| 4.2.2 血清和组织样品的制备 |
| 4.2.3 血清和组织中抗氧化能力相关指标测定 |
| 4.2.4 数据统计与分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 红花籽抗氧化肽SSPH-Ⅰ对小鼠体重的影响 |
| 4.3.2 红花籽抗氧化肽SSPH-Ⅰ对小鼠脏器指数的影响 |
| 4.3.3 红花籽抗氧化肽SSPH-Ⅰ对小鼠血清抗氧化功能的影响 |
| 4.3.4 红花籽抗氧化肽SSPH-Ⅰ对小鼠肝脏组织抗氧化功能的影响 |
| 4.3.5 红花籽抗氧化肽SSPH-Ⅰ对小鼠心脏组织抗氧化功能的影响 |
| 4.3.6 红花籽抗氧化肽SSPH-Ⅰ体内抗氧化活性的讨论 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 红花籽抗氧化肽饮料制备工艺研究 |
| 5.1 材料与设备 |
| 5.1.1 主要材料 |
| 5.1.2 仪器设备 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 红花籽抗氧化肽饮料制备工艺流程 |
| 5.2.2 抗氧化肽饮料调配单因素试验 |
| 5.2.3 抗氧化肽饮料调配响应面法优化 |
| 5.2.4 感官评分标准 |
| 5.2.5 抗氧化肽饮料灭菌 |
| 5.2.6 抗氧化肽饮料品质和贮藏稳定性分析 |
| 5.2.7 数据统计与分析 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 单因素试验 |
| 5.3.2 响应面法优化配比 |
| 5.3.3 响应面最优条件验证 |
| 5.3.4 抗氧化肽饮料灭菌 |
| 5.3.5 抗氧化肽饮料的品质和贮藏稳定性 |
| 5.4 本章小结 |
| 总结与展望 |
| 全文总结 |
| 创新点 |
| 展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位发表论文和参加科研情况说明 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 附录 |
（2）海蜇胶原抗氧化肽的制备分离、结构解析及活性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 海蜇概述 |
| 1.1.1 海蜇组成成分 |
| 1.1.2 海蜇胶原蛋白 |
| 1.1.3 海蜇胶原肽 |
| 1.2 活性氧自由基概述 |
| 1.3 食源性抗氧化肽概述 |
| 1.3.1 食源性抗氧化肽的制备 |
| 1.3.2 食源性抗氧化肽的分离鉴定 |
| 1.3.3 食源性抗氧化肽的评价方法 |
| 1.3.4 食源性抗氧化肽的构效关系 |
| 1.4 课题研究意义及技术路线 |
| 1.4.1 研究意义 |
| 1.4.2 技术路线 |
| 2 胶原蛋白结构特性研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料、试剂和设备 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 海蜇基本成分测定 |
| 2.3.2 胶原蛋白提取 |
| 2.3.3 胶原蛋白结构测定 |
| 2.4 统计分析 |
| 2.5 结果与讨论 |
| 2.5.1 海蜇基本成分分析 |
| 2.5.2 胶原蛋白亚基结构分析 |
| 2.5.3 胶原蛋白纯度分析 |
| 2.5.4 胶原蛋白二级结构分析 |
| 2.5.5 胶原蛋白氨基酸组成分析 |
| 2.5.6 胶原蛋白热稳定性分析 |
| 2.5.7 胶原蛋白结构分析 |
| 2.6 本章小结 |
| 3 海蜇胶原抗氧化肽制备及结构特性研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料、试剂和仪器设备 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 酶解工艺研究 |
| 3.3.2 抗氧化能力研究 |
| 3.3.3 结构特性研究 |
| 3.4 统计分析 |
| 3.5 结果与讨论 |
| 3.5.1 酶解工艺优化结果分析 |
| 3.5.2 抗氧化能力分析 |
| 3.5.3 结构特性分析 |
| 3.6 本章小结 |
| 4 海蜇胶原抗氧化肽分离纯化及氨基酸序列鉴定 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料、试剂和设备 |
| 4.2.1 实验材料与试剂 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 超滤分离 |
| 4.3.2 凝胶色谱分离 |
| 4.3.3 氨基酸序列鉴定 |
| 4.3.4 化学合成 |
| 4.4 统计分析 |
| 4.5 结果与讨论 |
| 4.5.1 超滤分离结果分析 |
| 4.5.2 凝胶色谱分离结果分析 |
| 4.5.3 氨基酸序列分析 |
| 4.5.4 合成及检测结果分析 |
| 4.6 本章小结 |
| 5 海蜇胶原抗氧化肽活性研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验材料、试剂和仪器设备 |
| 5.2.1 实验材料与试剂 |
| 5.2.2 实验仪器与设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 化学抗氧化能力测定 |
| 5.3.2 肽段间相互作用测定 |
| 5.3.3 HepG2细胞培养 |
| 5.3.4 细胞毒性测定 |
| 5.3.5 细胞抗氧化活性测定 |
| 5.3.6 H_2O_2-HepG2细胞氧化损伤模型的构建 |
| 5.3.7 肽段对H_2O_2-HepG2细胞氧化损伤的保护作用 |
| 5.3.8 细胞内ROS水平测定 |
| 5.4 统计分析 |
| 5.5 结果与讨论 |
| 5.5.1 各肽段化学抗氧化能力分析 |
| 5.5.2 肽段间相互作用分析 |
| 5.5.3 细胞毒性分析 |
| 5.5.4 细胞抗氧化活性分析 |
| 5.5.5 肽段对H_2O_2-HepG2细胞氧化损伤的保护作用分析 |
| 5.5.6 细胞内ROS水平分析 |
| 5.6 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
（3）羊血来源生物活性肽抗氧化活性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 血液资源的开发利用 |
| 1.2 生物活性肽的相关研究 |
| 1.3 生物活性肽的生产和制备 |
| 1.4 生物活性肽的作用 |
| 1.4.1 具有阿片肽活性作用 |
| 1.4.2 调节血压活性作用 |
| 1.4.3 抗菌活性作用 |
| 1.4.4 抗氧化活性作用 |
| 1.4.5 对胃肠道发育及其功能的影响 |
| 1.4.6 提升机体免疫能力 |
| 1.4.7 对氨基酸吸收及蛋白质合成的影响 |
| 1.5 抗氧化肽的研究现状 |
| 1.6 抗氧化肽的抗氧化原理 |
| 1.7 氧化应激 |
| 1.7.1 氧化应激的起因 |
| 1.7.2 氧化应激的危害 |
| 1.7.3 Nrf2-ARE抗氧化应激信号通路 |
| 1.7.4 Keap1 的基本结构 |
| 1.7.5 ARE的基本结构 |
| 1.7.6 Nrf2-ARE信号通路的激活机制 |
| 1.7.7 NF-KB信号通路的激活机制 |
| 1.8 本文的研究目的及意义 |
| 1.9 技术路线图 |
| 1.9.1 技术路线 |
| 2 试验研究 |
| 2.1 羊血来源抗氧化肽的酶解及其工艺优化 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 结果与分析 |
| 2.1.4 讨论 |
| 2.1.5 小结 |
| 2.2 羊血来源抗氧化肽体外抗氧化能力的确定 |
| 2.2.1 试验材料 |
| 2.2.2 试验方法 |
| 2.2.3 结果与分析 |
| 2.2.4 讨论 |
| 2.2.5 小结 |
| 2.3 羊血来源抗氧化肽体内抗氧化的研究 |
| 2.3.1 试验材料 |
| 2.3.2 结果与分析 |
| 2.3.3 讨论 |
| 2.3.4 小结 |
| 3 论文总体讨论 |
| 4 论文总体结论 |
| 5 本论文的创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（4）豆粕源抗氧化肽对急性酒精性肝损伤的预防作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩写词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 豆粕肽的研究简述 |
| 1.1.1 豆粕的简介 |
| 1.1.2 豆粕肽的理化特性 |
| 1.1.3 豆粕肽的功能活性 |
| 1.2 生物活性肽的研究概况 |
| 1.2.1 制备方法 |
| 1.2.2 分离纯化技术 |
| 1.2.3 结构鉴定 |
| 1.2.4 功能活性评价 |
| 1.3 酒精性肝损伤的研究进展 |
| 1.3.1 酒精的吸收代谢 |
| 1.3.2 酒精性肝损伤的概况 |
| 1.3.3 动物模型的构建 |
| 1.3.4 发病机制 |
| 1.4 组学的研究现状 |
| 1.4.1 基因组学 |
| 1.4.2 转录组学 |
| 1.4.3 蛋白质组学 |
| 1.4.4 代谢组学 |
| 1.5 研究意义及主要内容 |
| 1.5.1 研究意义 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 技术路线 |
| 第2章 豆粕源抗氧化肽的制备、纯化、鉴定及表征 |
| 2.1 材料与设备 |
| 2.1.1 材料与试剂 |
| 2.1.2 仪器与设备 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 SAPs的制备单因素实验 |
| 2.2.2 SAPs的制备响应面实验 |
| 2.2.3 SAPs的分离纯化 |
| 2.2.4 SAPs的序列鉴定及活性表征 |
| 2.2.5 体外抗氧化活性的测定方法 |
| 2.2.6 统计学分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 单因素实验结果 |
| 2.3.2 响应面实验结果 |
| 2.3.3 分离纯化结果 |
| 2.3.4 序列鉴定结果 |
| 2.3.5 活性表征结果 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 豆粕源抗氧化肽预防急性酒精性肝损伤的作用效果 |
| 3.1 材料与设备 |
| 3.1.1 材料与试剂 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 实验分组及造模方法 |
| 3.2.2 脏器系数的计算 |
| 3.2.3 血清指标的检测 |
| 3.2.4 肝脏匀浆指标的检测 |
| 3.2.5 肝脏与肾脏的病理形态学分析 |
| 3.2.6 统计学分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 ICR小鼠的生长情况 |
| 3.3.2 ICR小鼠的肝脏系数与脾脏系数 |
| 3.3.3 ICR小鼠的血清指标结果 |
| 3.3.4 ICR小鼠肝脏中氧化损伤指标结果 |
| 3.3.5 ICR小鼠肝脏中炎症指标结果 |
| 3.3.6 ICR小鼠的肝肾病理切片分析 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 豆粕源抗氧化肽预防急性酒精性肝损伤的作用机制 |
| 4.1 材料与设备 |
| 4.1.1 材料与试剂 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 RNA测序 |
| 4.2.2 基因信息分析 |
| 4.2.3 统计学分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 肝脏组织RNA的质量检测结果 |
| 4.3.2 测序数据的统计与质控结果 |
| 4.3.3 序列比对结果 |
| 4.3.4 基因表达量的结果 |
| 4.3.5 基因表达量的差异结果 |
| 4.3.6 差异基因集的功能注释结果 |
| 4.3.7 差异基因集的功能富集结果 |
| 4.3.8 SAPs预防急性酒精性肝损伤的作用机制 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 结论 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 导师简介 |
| 作者简介及科研成果 |
| 致谢 |
（5）茶叶厌氧发酵中高含量没食子酸形成以及茶蛋白降解促进活性肽释放的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 茶叶品质成分 |
| 1.1.1 茶多酚类 |
| 1.1.2 蛋白质、多肽和氨基酸 |
| 1.1.3 生物碱、茶多糖和其他成分 |
| 1.2 微生物发酵茶的品质形成 |
| 1.2.1 发酵中茶多酚和没食子酸的研究 |
| 1.2.2 发酵中蛋白质、多肽和氨基酸的研究 |
| 1.2.3 发酵中咖啡碱以及茶多糖等物质的研究 |
| 1.3 本研究的目的和意义 |
| 第二章 茶叶厌氧发酵中高含量没食子酸形成机理的研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 试验材料 |
| 2.2.2 厌氧发酵过程及样本取材 |
| 2.2.3 没食子酸、咖啡碱和儿茶素的定量检测 |
| 2.2.4 代谢成分的非靶检测 |
| 2.2.5 关键代谢物的靶向定量检测 |
| 2.2.6 发酵中微生物的提取与检测 |
| 2.2.7 微生物酶蛋白的提取与检测 |
| 2.2.8 统计分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 厌氧发酵中没食子酸、咖啡碱和儿茶素类的变化分析 |
| 2.3.2 代谢组学分析厌氧发酵中代谢物的变化 |
| 2.3.3 靶向定量分析形成没食子酸的前体物 |
| 2.3.4 微生物群落结构变化分析 |
| 2.3.5 厌氧发酵中作用没食子酸形成的关键微生物 |
| 2.3.6 厌氧发酵中作用没食子酸形成的微生物酶蛋白 |
| 2.3.7 厌氧发酵中高含量没食子酸形成途径的提出 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 非标记定量蛋白质组学揭示厌氧发酵中发生显着变化的重要茶蛋白 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 厌氧发酵过程及取样 |
| 3.2.2 茶叶蛋白质组的检测 |
| 3.2.3 可溶性蛋白检测 |
| 3.2.4 发酵中微生物的提取与检测 |
| 3.2.5 统计分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 酸茶蛋白质组成 |
| 3.3.2 厌氧发酵中茶蛋白的变化分析 |
| 3.3.3 厌氧发酵中显着变化的重要茶蛋白 |
| 3.3.4 微生物对茶蛋白变化的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 厌氧发酵中茶叶蛋白降解对多肽释放的影响 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试验试剂 |
| 4.2.2 厌氧发酵及样品取材 |
| 4.2.3 pH值和氨基酸总量的检测 |
| 4.2.4 抗氧化力检测 |
| 4.2.5 18 种游离氨基酸的定量检测 |
| 4.2.6 短肽的检测 |
| 4.2.7 统计分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 厌氧发酵中酸度和氨基酸总量的变化分析 |
| 4.3.2 厌氧发酵中18 种游离氨基酸的含量变化分析 |
| 4.3.3 厌氧发酵中短肽的变化分析 |
| 4.3.4 厌氧发酵中抗氧化肽的预测及抗氧化性能的分析 |
| 4.3.5 厌氧发酵中蛋白降解对多肽释放的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间发表的论文情况 |
| 致谢 |
（6）大米抗氧化肽的制备及其抗衰老功能研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 抗氧化肽研究概述 |
| 1.1.1 制备方法 |
| 1.1.2 活性评价方法 |
| 1.1.3 构效关系 |
| 1.1.4 分离纯化与鉴定 |
| 1.2 抗衰老研究现状 |
| 1.2.1 自由基衰老学说 |
| 1.2.2 抗衰老活性物质 |
| 1.2.3 衰老的动物模型——果蝇 |
| 1.3 大米抗氧化肽研究进展 |
| 1.4 本课题研究内容及意义 |
| 1.4.1 研究内容 |
| 1.4.2 研究目的与意义 |
| 第二章 大米抗氧化肽的制备工艺优化 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与仪器 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 大米蛋白基本成分分析 |
| 2.3.2 大米抗氧化肽的制备 |
| 2.3.3 蛋白酶的筛选 |
| 2.3.4 单因素实验 |
| 2.3.5 响应面优化实验 |
| 2.3.6 神经网络及遗传算法优化工艺 |
| 2.3.7 指标测定方法 |
| 2.3.8 数据分析 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 大米蛋白基本成分分析 |
| 2.4.2 蛋白酶的筛选 |
| 2.4.3 单因素实验 |
| 2.4.4 响应面实验结果分析 |
| 2.4.5 神经网络模型及遗传算法分析 |
| 2.4.6 响应面实验与神经网络-遗传算法的对比 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 大米抗氧化肽体外抗氧化能力的测定及结构表征 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与仪器 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 大米抗氧化肽氨基酸组成分析 |
| 3.3.2 大米抗氧化肽的体外抗氧化能力测定 |
| 3.3.3 大米抗氧化肽的结构表征 |
| 3.3.4 数据分析 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 大米抗氧化肽氨基酸组成分析 |
| 3.4.2 大米抗氧化肽的体外抗氧化能力评价 |
| 3.4.3 大米抗氧化肽的结构表征分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 大米抗氧化肽的抗衰老作用及机理初探 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与仪器 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 仪器与设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 培养基的配制 |
| 4.3.2 果蝇生存实验 |
| 4.3.3 果蝇爬行实验 |
| 4.3.4 果蝇摄食实验 |
| 4.3.5 果蝇体内抗氧化酶活力和MDA含量测定 |
| 4.3.6 果蝇极性实验 |
| 4.3.7 果蝇总m RNA提取及RT-PCR |
| 4.3.8 数据分析 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 大米抗氧化肽对果蝇寿命的影响 |
| 4.4.2 大米抗氧化肽对果蝇爬行能力的影响 |
| 4.4.3 大米抗氧化肽对果蝇摄食量的影响 |
| 4.4.4 大米抗氧化肽对果蝇体内抗氧化酶活性的影响 |
| 4.4.5 大米抗氧化肽对果蝇体内MDA含量的影响 |
| 4.4.6 果蝇急性实验 |
| 4.4.7 抗衰老相关机理初探 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 大米抗氧化肽的分离鉴定及构效关系研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与仪器 |
| 5.2.1 材料与试剂 |
| 5.2.2 仪器与设备 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 紫外光谱扫描 |
| 5.3.2 大米抗氧化肽的分子量分布测定 |
| 5.3.3 大米抗氧化肽的分离纯化 |
| 5.3.4 抗氧化肽各组分的体外抗氧化能力测定 |
| 5.3.5 大米抗氧化肽的序列鉴定 |
| 5.3.6 分子对接 |
| 5.3.7 数据分析 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 抗氧化肽检测波长的选择 |
| 5.4.2 大米抗氧化肽的相对分子量分布 |
| 5.4.3 大米抗氧化肽各组分抗氧化能力分析 |
| 5.4.4 大米抗氧化肽组分序列鉴定 |
| 5.4.5 分子对接结果分析 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 科研成果 |
（7）英国红芸豆蛋白抗氧化肽糖基化改性及产物功能性质研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 英国红芸豆 |
| 1.2 抗氧化剂 |
| 1.3 抗氧化肽的研究现状 |
| 1.4 抗氧化肽改性的研究现状 |
| 1.4.1 抗氧化肽改性方法 |
| 1.4.2 抗氧化肽糖基化改性 |
| 1.4.3 抗氧化活性测定方法研究现状 |
| 1.4.4 糖基化改性产物分析 |
| 1.5 课题的研究背景及意义 |
| 1.6 研究的主要内容 |
| 1.6.1 英国红芸豆抗氧化肽的制备 |
| 1.6.2 糖基化改性条件的优化及体外抗氧化活性测定 |
| 1.6.3 糖基化改性产物的分析 |
| 1.6.4 糖基化改性产物功能性质分析 |
| 1.6.5 糖基化改性产物体外胃肠道模拟消化分析 |
| 1.7 技术路线 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验试剂 |
| 2.3 试验主要仪器设备 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 糖基化改性条件的优化 |
| 2.4.2 糖基化改性产物分析 |
| 2.4.3 糖基化改性产物功能性质分析 |
| 2.4.4 体外胃肠道模拟消化分析 |
| 2.5 数据统计分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 糖基化改性条件的优化 |
| 3.1.1 最佳还原糖的确定 |
| 3.1.2 单因素、正交试验优化糖基化改性条件 |
| 3.1.3 丙烯酰胺标准曲线 |
| 3.1.4 糖基化改性产物得率测定 |
| 3.1.5 糖基化改性前后体外抗氧化活性分析 |
| 3.2 糖基化改性产物分析 |
| 3.2.1 褐变程度测定 |
| 3.2.2 接枝度的测定 |
| 3.2.3 粒径分布测定 |
| 3.2.4 Zeta电位测定 |
| 3.2.5 荧光光谱分析 |
| 3.2.6 紫外光谱分析 |
| 3.2.7 傅里叶中红外光谱分析 |
| 3.2.8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 |
| 3.3 糖基化改性产物功能性质分析 |
| 3.3.1 溶解性测定 |
| 3.3.2 起泡性和起泡稳定性测定 |
| 3.3.3 乳化性和乳化稳定性测定 |
| 3.3.4 吸油性和吸水性测定 |
| 3.3.5 黏度测定 |
| 3.3.6 游离巯基含量测定 |
| 3.3.7 表面疏水性测定 |
| 3.4 体外胃肠道模拟消化分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 英国红芸豆抗氧化肽糖基化改性条件的优化 |
| 4.2 糖基化改性产物分析 |
| 4.3 糖基化改性产物功能性质测定 |
| 5 结论 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）英国红芸豆抗氧化肽对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 文献综述 |
| 1.1 芸豆概述 |
| 1.2 氧化应激 |
| 1.2.1 引起氧化应激的内外因素 |
| 1.2.2 氧化应激与细胞线粒体损伤 |
| 1.3 抗氧化防御系统 |
| 1.3.1 抗氧化剂 |
| 1.3.2 抗氧化肽的研究进展 |
| 1.4 课题研究目的和意义 |
| 1.5 课题研究的内容 |
| 1.5.1 研究内容 |
| 1.5.2 技术路线 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料与试剂 |
| 2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 英国红芸豆蛋白质的制备 |
| 2.3.2 英国红芸豆抗氧化肽的制备 |
| 2.3.3 英国红芸豆抗氧化肽的超滤分级 |
| 2.3.4 英国红芸豆抗氧化肽抗氧化活性的测定 |
| 2.3.5 葡聚糖凝胶G-15 层析分离纯化英国红芸豆抗氧化肽 |
| 2.3.6 细胞培养及分组 |
| 2.3.7 H_2O_2诱导PC12细胞氧化应激损伤模型的建立 |
| 2.3.8 抗氧化肽组分浓度及阳性对照VC浓度对H_2O_2诱导PC12细胞损伤作用的影响 |
| 2.3.9 抗氧化肽组分对PC12细胞毒性的作用 |
| 2.3.10 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞的形态观察 |
| 2.3.11 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞外LDH活力的影响 |
| 2.3.12 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内MDA含量的影响 |
| 2.3.13 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内ROS的影响 |
| 2.3.14 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内抗氧化酶及抗氧化物的影响 |
| 2.3.15 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内MMP的影响 |
| 2.3.16 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞周期的影响 |
| 2.3.17 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内Caspase-3及Caspase-9活力的影响 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 英国红芸豆抗氧化肽抗氧化活性的测定 |
| 3.1.1 羟自由基清除能力的测定 |
| 3.1.2 DPPH自由基清除能力的测定 |
| 3.1.3 还原力的测定 |
| 3.2 Sephadex G-15层析分离英国红芸豆抗氧化肽 |
| 3.3 H_2O_2诱导PC12细胞氧化应激损伤模型的建立 |
| 3.4 抗氧化肽组分浓度及阳性对照VC浓度对H_2O_2诱导PC12细胞的影响 |
| 3.5 利用MTT法分析抗氧化肽对PC12细胞的毒性 |
| 3.6 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞的形态观察 |
| 3.7 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞外LDH活力的影响 |
| 3.8 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内ROS的影响 |
| 3.9 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内MDA的影响 |
| 3.10 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内抗氧化酶及抗氧化物的影响 |
| 3.11 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内MMP的影响 |
| 3.12 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞周期的影响 |
| 3.13 抗氧化肽组分对H_2O_2诱导PC12细胞内Caspase-3及Caspase-9活力的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 英国红芸豆抗氧化肽体外抗氧化活性的测定 |
| 4.2 英国红芸豆抗氧化肽对H_2O_2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用 |
| 4.2.1 BRKBAPC-2对氧化损伤细胞的细胞存活率以及细胞形态的保护作用 |
| 4.2.2 BRKBAPC-2对氧化损伤细胞的氧化因子LDH、ROS以及MDA的影响 |
| 4.2.3 BRKBAPC-2对氧化损伤细胞的抗氧化水平中抗氧化酶活力和抗氧化物含量的影响 |
| 4.2.4 BRKBAPC-2对氧化损伤细胞的抗氧化机制的深入研究 |
| 5 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 项目资助情况 |
（9）羊骨多肽的制备及其抗氧化能力研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 立题背景 |
| 1.2 羊骨资源的概况 |
| 1.2.1 羊骨的营养价值 |
| 1.2.2 羊骨的研究现状 |
| 1.3 生物活性肽 |
| 1.4 抗氧化肽 |
| 1.4.1 自由基与氧化应激 |
| 1.4.2 体内外抗氧化物质 |
| 1.4.3 抗氧化肽研究进展 |
| 1.5 本课题研究内容、目的意义 |
| 1.5.1 研究内容、技术路线 |
| 1.5.2 目的意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 试验原料 |
| 2.1.2 主要试剂及来源 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 羊骨预处理 |
| 2.2.2 羊骨基本成分测定及氨基酸组成分析 |
| 2.2.3 羊骨酶解产物制备 |
| 2.2.4 酶解条件优化 |
| 2.2.5 试验指标测定 |
| 2.2.6 羊骨抗氧化肽稳定性研究 |
| 2.2.7 羊骨抗氧化肽体外模拟胃肠消化试验 |
| 2.2.8 羊骨抗氧化肽结构表征测定 |
| 2.2.9 羊骨抗氧化肽的分离纯化 |
| 2.2.10 羊骨抗氧化肽结构鉴定 |
| 2.2.11 羊骨抗氧化肽合成 |
| 2.3 数据统计分析 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 羊骨基本营养成分分析 |
| 3.1.1 羊骨常规营养成分分析 |
| 3.1.2 羊骨氨基酸组成分析 |
| 3.2 羊骨抗氧化肽制备工艺优化 |
| 3.2.1 蛋白酶筛选 |
| 3.2.2 羊骨抗氧化肽制备的单因素试验 |
| 3.2.3 羊骨抗氧化肽响应面优化 |
| 3.3 羊骨抗氧化肽抗氧化能力分析及稳定性研究 |
| 3.3.1 羊骨抗氧化肽抗氧化能力分析 |
| 3.3.2 羊骨抗氧化肽稳定性研究 |
| 3.3.3 羊骨抗氧化肽体外模拟胃肠消化试验分析 |
| 3.4 羊骨抗氧化肽结构表征分析 |
| 3.4.1 X-射线衍射 |
| 3.4.2 圆二色谱测定 |
| 3.4.3 傅里叶变换红外光谱测定 |
| 3.4.4 电镜扫描测定 |
| 3.5 抗氧化肽分离纯化及质谱鉴定 |
| 3.5.1 羊骨抗氧化肽超滤组分体外抗氧化活性研究 |
| 3.5.2 不同肽段氨基酸组成分析 |
| 3.5.3 不同超滤组分电镜扫描分析 |
| 3.5.4 不同超滤组分胃肠消化稳定性分析 |
| 3.5.5 抗氧化肽质谱鉴定 |
| 3.5.6 抗氧化肽功能注释 |
| 3.5.7 羊骨多肽活性序列分析 |
| 3.6 抗氧化肽固相合成及活性验证 |
| 3.6.1 合成肽潜在生物活性预测 |
| 3.6.2 合成肽的理化性质和结构 |
| 3.6.3 合成肽的安全性预测 |
| 3.6.4 合成肽活性验证 |
| 4 结论、创新点与展望 |
| 4.1 结论 |
| 4.2 创新点 |
| 4.3 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（10）龙须菜抗氧化肽的制备、分离纯化及结构鉴定（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 引言 |
| 1.1 龙须菜概述 |
| 1.2 海藻蛋白的提取 |
| 1.2.1 化学提取 |
| 1.2.2 物理提取 |
| 1.2.3 联合提取法 |
| 1.3 海藻活性肽 |
| 1.3.1 海藻活性肽的分类 |
| 1.3.2 海藻活性肽的制备 |
| 1.3.3 海藻活性肽的分离纯化 |
| 1.3.4 结构分析 |
| 1.4 抗氧化肽 |
| 1.4.1 氧化应激 |
| 1.4.2 作用机制 |
| 1.4.3 评价方法 |
| 1.5 立论依据及研究内容 |
| 1.5.1 立论依据 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 第2章 响应面法优化超声辅助碱提酸沉法制备龙须菜蛋白质及其抗氧化活性 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与仪器 |
| 2.2.1 材料与试剂 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 龙须菜蛋白制备工艺 |
| 2.3.2 单因素实验 |
| 2.3.3 响应面优化实验 |
| 2.3.4 抗氧化活性的测定 |
| 2.3.5 蛋白氨基酸组成 |
| 2.3.6 数据处理 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 不同提取条件对龙须菜蛋白提取率的影响 |
| 2.4.2 响应面分析 |
| 2.4.3 龙须菜蛋白抗氧化活性 |
| 2.4.4 龙须菜蛋白质氨基酸分析 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 龙须菜蛋白质酶解条件工艺优化及酶解产物抗氧化活性 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与仪器 |
| 3.2.1 材料与试剂 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 龙须菜蛋白的制备 |
| 3.3.2 龙须菜蛋白酶解工艺 |
| 3.3.3 单因素实验 |
| 3.3.4 正交实验 |
| 3.3.5 水解度(degree of hydrolysis,DH)的测定 |
| 3.3.6 酶解产物抗氧化活性的测定 |
| 3.3.7 酶解产物氨基酸测定 |
| 3.3.8 红外光谱扫描 |
| 3.3.9 数据处理 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 龙须菜蛋白质水解酶种类的确定 |
| 3.4.2 单因素实验 |
| 3.4.3 酶解正交实验 |
| 3.4.4 氨基酸组成分析 |
| 3.4.5 傅里叶红外光谱分析 |
| 3.5 小结 |
| 第4章 龙须菜抗氧化肽的分离纯化及其结构鉴定 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与仪器 |
| 4.2.1 材料与试剂 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 龙须菜酶解产物的制备 |
| 4.3.2 抗氧化活性的测定 |
| 4.3.3 高效分子排阻色谱(分子量的测定) |
| 4.3.4 凝胶色谱层析 |
| 4.3.5 反相高效液相层析RP-HPLC |
| 4.3.6 质谱鉴定 |
| 4.3.7 性质预测 |
| 4.3.8 固相合成 |
| 4.3.9 多肽稳定性 |
| 4.3.10 分子对接 |
| 4.3.11 数据处理 |
| 4.4 结果与分析 |
| 4.4.1 酶解产物分子量分布 |
| 4.4.2 酶解产物的分离纯化 |
| 4.4.3 酶解产物的结构鉴定 |
| 4.4.4 合成肽的抗氧化活性 |
| 4.4.5 合成肽性质 |
| 4.4.6 合成肽的稳定性研究 |
| 4.4.7 分子对接 |
| 4.5 小结 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间论文研究成果 |
四、简述抗氧化肽的作用（论文参考文献）
- [1]红花籽蛋白制备抗氧化肽的研究及应用[D]. 刘晓艺. 河北工程大学, 2021
- [2]海蜇胶原抗氧化肽的制备分离、结构解析及活性研究[D]. 冯玲玲. 哈尔滨商业大学, 2021(12)
- [3]羊血来源生物活性肽抗氧化活性的研究[D]. 王珍如. 内蒙古农业大学, 2021(02)
- [4]豆粕源抗氧化肽对急性酒精性肝损伤的预防作用及机制研究[D]. 蔡转章. 吉林大学, 2021(01)
- [5]茶叶厌氧发酵中高含量没食子酸形成以及茶蛋白降解促进活性肽释放的研究[D]. 张欢. 华中农业大学, 2021(02)
- [6]大米抗氧化肽的制备及其抗衰老功能研究[D]. 岳阳. 浙江大学, 2021(01)
- [7]英国红芸豆蛋白抗氧化肽糖基化改性及产物功能性质研究[D]. 赵玉滨. 黑龙江八一农垦大学, 2021
- [8]英国红芸豆抗氧化肽对H2O2诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用[D]. 穆秋霞. 黑龙江八一农垦大学, 2021(09)
- [9]羊骨多肽的制备及其抗氧化能力研究[D]. 张靖. 内蒙古农业大学, 2021(02)
- [10]龙须菜抗氧化肽的制备、分离纯化及结构鉴定[D]. 刘晶. 上海海洋大学, 2021